Kodėl gliukozė naudojama plazmidės DNR išskyrimui?
Kodėl gliukozė naudojama plazmidės DNR išskyrimui?

Video: Kodėl gliukozė naudojama plazmidės DNR išskyrimui?

Video: Kodėl gliukozė naudojama plazmidės DNR išskyrimui?
Video: DNR išskyrimas iš seilių naudojant organinius tirpiklius. 2024, Balandis
Anonim

Šio žingsnio tikslas – padidinti pradinį ląstelių tūrį, kad daugiau plazmidės DNR gali būti izoliuotas per paruošimą. gliukozė pridedama siekiant padidinti osmosinį slėgį už ląstelių ribų. Tris yra buferinė medžiaga naudojamas palaikyti pastovų pH (= 8,0).

Be to, koks yra gliukozės vaidmuo DNR išskyrime?

50 mM (milimolinis) gliukozės cukraus Dedamas į GTE buferį, kad būtų išlaikytas osmoliariškumas, kai tirpių medžiagų koncentracija už ląstelių yra artima ląstelių viduje esančiai koncentracijai. Tai apsaugo nuo ankstyvos ląstelių lizės, kuri gali sukelti mažesnį DNR duoda derlių dėl agregacijos ir degradacijos.

Be to, kodėl NaOH naudojamas DNR ekstrahavimui? In DNR izoliacija arba gavyba , NaOH ( Natrio hidroksidas ) yra naudojamas kaip šarminis lizės buferis. Iš esmės jis padeda ištirpinti ląstelės membraną, kad vidiniai ląstelės komponentai, įskaitant DNR išeik.

Taigi, koks yra plazmidės DNR išskyrimo tikslas?

Plazmidžių izoliacija . The Isolation apie plazmidės DNR iš bakterijų yra labai svarbus molekulinės biologijos metodas ir yra esminis daugelio procedūrų, tokių kaip klonavimas, etapas, DNR sekos nustatymas, transfekcija ir genų terapija. Šios manipuliacijos reikalauja Isolation didelio grynumo plazmidės DNR.

Kaip atskirti plazmidinę DNR iš E coli?

The Isolation apie plazmidės DNR iš E . coli šarminės lizės naudojimas yra nusistovėjęs metodas. E . coli su plazmidė yra kultivuojamas terpėje su antibiotikais iki didelio ląstelių tankio, surenkamas ir lizuojamas SDS/NaOH tirpalu.

Rekomenduojamas: