Kodėl restrikcijos fermentas nesumažėtų?
Kodėl restrikcijos fermentas nesumažėtų?

Video: Kodėl restrikcijos fermentas nesumažėtų?

Video: Kodėl restrikcijos fermentas nesumažėtų?
Video: Restriction enzymes 2024, Lapkritis
Anonim

Gali būti keletas skirtingų priežasčių, kodėl jūsų restrikcijos fermentas nepjauna DNR, kaip apžvelgta šiame vaizdo įraše. Skaldomos DNR paruošimas turėtų neturi būti teršalų, tokių kaip fenolis, chloroformas, alkoholis, EDTA, ploviklių arba per daug druskų, kurie gali trukdyti restrikcijos fermentas veikla.

Šiuo atžvilgiu kodėl restrikcijos fermentai nesupjausto bakterijų DNR?

Bakterijos turėti restrikcijos fermentai , taip pat vadinama restrikcijos endonukleazės , kuris supjaustyti dvigubas DNR tam tikruose taškuose į fragmentus. Įdomu, restrikcijos fermentai neskaldykite savo DNR . Bakterijos užkirsti kelią saviesiems DNR nuo pjaustymo iki restrikcijos fermentas per metilinimą apribojimas svetaines.

Taip pat galima paklausti, kur pjauna restrikcijos fermentai? Restrikcijos fermentas Tipai Paprastai I tipas fermentai supjaustyti DNR vietose, nutolusiose nuo atpažinimo sekos; II tipas supjaustyti DNR atpažinimo sekoje arba jai artima; III tipas supjaustyti DNR artimos atpažinimo sekos; ir IV tipo skaldo metilintą DNR.

Panašiai klausiama, kas atsitiks, jei pridėsite per daug restrikcijos fermento?

Gali atsirasti nepilnas virškinimas kai per daug arba taip pat mažai fermentas yra naudojamas. The teršalų buvimas viduje į DNR mėginys gali slopinti fermentai o tai taip pat sukelia nepilną virškinimą. Kai kurie restrikcijos fermentai reikia kofaktorių pilnai veiklai.

Kodėl mano apribojimų santrauka neveikia?

Nebaigta arba ne virškinimas dėl DNR metilinimo blokuojamo fermento aktyvumo. Jeigu Jūsų fermentas aktyvus ir virškina kontroliuoti DNR ir į reakcija nustatoma optimaliomis sąlygomis, bet vis tiek matote Problemos su virškinimas , gali būti todėl į fermentą slopina metilinimas į šablono DNR.

Rekomenduojamas: