Kaip veikia Gibsono klonavimas?
Kaip veikia Gibsono klonavimas?

Video: Kaip veikia Gibsono klonavimas?

Video: Kaip veikia Gibsono klonavimas?
Video: Saulės moduliai, kaip jie veikia? || paMOKSLAS || S01E06 2024, Lapkritis
Anonim

The Gibsono klonavimas Pagrindinis mišinys susideda iš trijų skirtingų fermentų viename buferyje. Kiekvienas fermentas atlieka specifinę ir unikalią reakcijos funkciją: T5 egzonukleazė – sukuria vienos grandinės DNR 3' iškyšas, kramtydamas atgal nuo DNR 5' galo. Vėliau papildomi DNR fragmentai gali susijungti vienas su kitu.

Atsižvelgiant į tai, kaip veikia Gibsonas?

The Gibsonas Assembly® metodas yra klonavimo procedūra, leidžianti klonuoti du ar daugiau fragmentų, nereikalaujant restrikcijos fermento virškinimo ar suderinamų restrikcijos vietų. Vietoj to, naudotojo nustatyti persidengiantys galai yra įtraukti į fragmentus, kad būtų galima sklandžiai sujungti gretimus fragmentus.

Panašiai, kas yra Gibson Assembly Master Mix? The Gibson Cloning Master Mix susideda iš trijų skirtingų fermentų viename buferyje. Kiekvienas fermentas atlieka specifinę ir unikalią reakcijos funkciją: T5 egzonukleazė – sukuria vienos grandinės DNR 3' iškyšas, kramtydamas atgal nuo DNR 5' galo. Vėliau papildomi DNR fragmentai gali susijungti vienas su kitu.

Kaip tokiu būdu veikia „Golden Gate“surinkimas?

Auksiniai vartai klonavimas arba Auksinių vartų surinkimas yra molekulinio klonavimo metodas, leidžiantis tyrėjui vienu metu ir kryptingai surinkti kelis DNR fragmentus į vieną gabalą, naudojant IIs tipo restrikcijos fermentus ir T4 DNR ligazę. Tai surinkimas yra atliekami in vitro.

Kaip veikia „Gateway“klonavimas?

The GATEWAY Klonavimas Technologija pagrįsta vietai būdinga rekombinacijos sistema, kurią fagas l naudoja savo DNR integravimui į E. AttL ir attR vietos, supančios įterptą fago DNR, per iškirpimo įvykį rekombinuojasi konkrečiai vietai, kad pakeistų attP vietą fage l ir attB svetainėje E.

Rekomenduojamas: