Turinys:

Kaip įterpti geną į plazmidę?
Kaip įterpti geną į plazmidę?

Video: Kaip įterpti geną į plazmidę?

Video: Kaip įterpti geną į plazmidę?
Video: DNA cloning and recombinant DNA | Biomolecules | MCAT | Khan Academy 2024, Lapkritis
Anonim

Pagrindiniai žingsniai yra šie:

  1. Iškirpkite plazmidė ir „įklijuoti“į genas . Šis procesas priklauso nuo restrikcijos fermentų (kurie supjausto DNR) ir DNR ligazės (kuri sujungia DNR).
  2. Įdėti į plazmidė į bakterijų.
  3. Užaugti daug plazmidė -nešančios bakterijas ir panaudoti jas kaip „gamykles“baltymams gaminti.

Be to, kaip geną galima įterpti į plazmidę GCSE?

tai yra įterptas į plazmidę naudojant ligazės fermentus. į plazmidė eina į bakterinė ląstelė. transgeninė bakterija dauginasi, todėl in milijonai identiškų bakterijų, gaminančių žmogaus insuliną.

Be to, kaip subklonuoti geną? Pagrindiniai žingsniai, skirti Subklonavimas Jūs atleidžiate ir išvalote savo intarpą iš pirminio vektoriaus, surišate šį intarpą į paruoštą paskirties vektorių, paverčiate šią ligavimo reakciją į kompetentingas bakterines ląsteles. Tada peržiūrite transformuotas ląsteles įdėklui.

Turint tai omenyje, kokie yra 4 genų klonavimo žingsniai?

Klasikiniuose restrikcijos fermentų virškinimo ir ligavimo klonavimo protokoluose bet kurio DNR fragmento klonavimas iš esmės apima keturis etapus:

  • dominančios DNR (arba tikslinės DNR) išskyrimas,
  • perrišimas,
  • transfekcija (arba transformacija) ir.
  • atrankos/atrankos procedūra.

Kaip amplifikuoti plazmidę?

Eksperimentinė procedūra

  1. Vykdykite PGR ir išgryninkite PGR produktą: paleiskite PGR, kad amplifikuotumėte savo intarpo DNR.
  2. Suvirškinkite savo DNR:
  3. Išskirkite intarpą ir vektorių grynindami geliu:
  4. Prijunkite intarpą į vektorių:
  5. Transformacija:
  6. Išskirkite gatavą plazmidę:
  7. Patikrinkite savo plazmidę nustatydami seką:

Rekomenduojamas: