Kaip veikia „Sanger“DNR sekos nustatymas?
Kaip veikia „Sanger“DNR sekos nustatymas?

Video: Kaip veikia „Sanger“DNR sekos nustatymas?

Video: Kaip veikia „Sanger“DNR sekos nustatymas?
Video: How does Sanger Sequencing Work? – Seq It Out #1 2024, Lapkritis
Anonim

Sangerio sekos nustatymas dėl to susidaro įvairaus ilgio pratęsimo produktai, baigiami dideoksinukleotidais 3' gale. Tada prailginimo produktai atskiriami kapiliarine elektroforeze arba CE. Molekulės elektros srove įpurškiamos į ilgą stiklinį kapiliarą, užpildytą gelio polimeru.

Tokiu būdu, koks yra Sangerio DNR sekos nustatymo metodas?

Sangerio sekos nustatymas , taip pat žinomas kaip grandinės nutraukimas metodas , yra technika, skirta DNR sekos nustatymas pagrįstas selektyviu grandinę baigiančių dideoksinukleotidų (ddNTP) įtraukimu DNR polimerazė in vitro metu DNR replikacija. Jį sukūrė Frederikas Sangeris ir kolegos 1977 m.

Be to, kaip veikia grandinės nutraukimo seka? Sangerio DNR seka taip pat žinomas kaip grandinė - nutraukimas metodas sekos nustatymas . ddNTPs rezultatas nutraukimas DNR grandinės, nes ddNTP trūksta 3'-OH grupės, reikalingos fosfodiesterio ryšiui tarp nukleotidų susidaryti. Be šios jungties, grandinė Susidarančių nukleotidų yra nutraukta.

Tiesiog taip, kodėl mes atliekame Sangerio seką?

Sangerio sekos nustatymas yra a metodas apie DNR sekos nustatymas remiantis selektyviu grandinę baigiančių dideoksinukleotidų inkorporavimu DNR polimerazė in vitro metu DNR replikacija. Jis vis dar turi pranašumą prieš trumpą skaitymą seka technologijas (pvz., „Illumina“) gali gaminti DNR seka nuskaito > 500 nukleotidų.

Ar Sangerio sekos nustatymas yra tikslus?

Sangerio sekos nustatymas su 99,99 proc. tikslumas yra klinikinių tyrimų „auksinis standartas“. sekos nustatymas . Tačiau naujesnės NGS technologijos taip pat tampa įprastos klinikinių tyrimų laboratorijose dėl didesnių jų pralaidumo galimybių ir mažesnių kaštų vienam mėginiui.

Rekomenduojamas: